Se trata de una
técnica usada para crear un gran número de copias de un segmento de ADN, que
utiliza ciclos de desnaturalización a 94-95 ° C (calentamiento
del ADN para su rompimiento o separación de las cadenas), se enfría para
agregar los cebadores y extensión por una ADN polimerasa termoresistente
sintetizando en el sentido 5´à 3´ (Ver figura
6).
Figura 6 |
Hasta la década
de 1980, el único método para obtener grandes cantidades de un fragmento de ADN
era clonándolo en vectores adecuados e introduciéndolo y multiplicándolo en
bacterias. En el año 1985, un investigador norteamericano, Kary Mullis,
desarrolló un método que permite, a partir de una muestra muy pequeña de ADN,
obtener millones de copias de ADN in vitro, en unas pocas horas y sin
necesidad de usar células vivas. Esta técnica, llamada reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), requiere conocer la secuencia de nucleótidos de los extremos
del fragmento que se quiere amplificar. Estas secuencias se usan para diseñar
dos oligonucleótidos sintéticos de ADN complementarios a una porción de cada
una de las dos cadenas de la doble hélice.
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